培养皿通常使用固体培养基制成平板培养(就是平板皿名称的由来)，平板培养基制作是将已装好的灭菌琼脂培养基，用温水(无菌)溶化，取下试管棉花塞，管口于酒精灯火焰上通过，然后微启灭菌的培养皿盖，使试管口能深入为宜，倾入培养基后即可盖密，再轻轻地摇匀倾入的培养基，使之均匀地分布于皿底上凝结，即得平板培养基。

       由于细菌的繁殖、发育生长是与所供给的培养基(营养)有直接关系，尤其是作定量检验分析，对提供营养物的多少，有决定意义。

       细菌培养时对营养提供的多秒、是否均匀，培养皿皿底是否平整极为重要，如培养皿皿底不平，琼脂的培养基分布将随培养皿皿底是否平整有厚有薄，薄的部分营养供给就不足，这对定量分析有着密切关系，故对定量培养皿皿底要求特别平整拜原因所在。但作一般定性(检验细菌、菌落生长、繁殖等)，使用普通培养皿即可。

       细菌的分离培养，一般标本中常同时混有数种细菌，如口腔咽喉菌及耳朵的分泌物、痰液、小便、大便等，凡需研究的细菌，须先用分离培养法，使其成纯种培养，通过对细菌作纯种培养，用肉汁加2%琼脂的固体培养基，经保温漏斗以脱脂棉花过滤，注入试管中，二天后检验无新菌，再投入培养皿内，先制成平板，在无菌条件下进行接种，接种后把培养皿倒置移入25～35℃的恒温箱内(倒置是避免水蒸气凝成液滴滴入皿底内，影响菌落的生长)，通过培养进一步观察细菌的形态和色泽，研究致病的病菌，以及对化防治的效果。